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微流控芯片光學(xué)方法檢測(cè)心肌標(biāo)志物

2021-01-19

        使用高精度激光雕刻機(jī)加工微流控芯片可完成此次試驗(yàn)!
        目前對(duì)于心肌標(biāo)志物的檢測(cè),大多是基于抗原抗體的免疫反應(yīng).生物學(xué)家通常利用熒光物質(zhì) 標(biāo)記抗原或抗體或酶標(biāo)抗體,然后從反應(yīng)生成物的熒光強(qiáng)度、反應(yīng)底物比色和捕獲化學(xué)發(fā)光底物微光來定量被檢測(cè)物的濃度.底物可見光比色法因靈敏度相對(duì)較低,一般無法滿足低濃度心肌標(biāo)志物的檢測(cè)需求,應(yīng)用較少.而熒光免疫方法因具高靈敏度而被多數(shù)研究者采納.
        對(duì)于微流控芯片微米級(jí)的檢測(cè)通道,熒光免疫方法有時(shí)并不能滿足低濃度心肌標(biāo)志物的檢測(cè)要求.為此,有團(tuán)隊(duì)創(chuàng)造性地設(shè)計(jì)了濃縮熒光標(biāo)記物的反應(yīng)池和嵌入式光電倍增管檢測(cè)裝置,實(shí)現(xiàn)了對(duì)C反應(yīng)蛋白(C-Reactive Protein,CRP)的低濃度檢測(cè).其具體實(shí)驗(yàn)過程如下:首先制作了帶1mm×0.8mm×30um預(yù)濃縮反應(yīng)池的T型聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane,PDMS)芯片,在反應(yīng)池中設(shè)計(jì)物理微結(jié)構(gòu)富集CRP抗體包被的磁珠;然后將熒光標(biāo)記的CRP抗原和待檢測(cè)CRP抗原注入反應(yīng)池,孵育后洗脫熒光標(biāo)記;最后在反應(yīng)池下游微通道利用嵌入式光電倍增管檢測(cè)熒光信號(hào),結(jié)果測(cè)得CRP最低檢測(cè)限為1.4 nmol/L.該方法有效地提高了檢測(cè)的靈敏度,但缺點(diǎn)在于磁珠修飾抗體和熒光標(biāo)記抗原等操作都必須在芯片外進(jìn)行,檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng).

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